每日一题|NO.331 试述循环肿瘤细胞（ctDNA）在肾细胞癌中的研究进展

试述循环肿瘤细胞（ctDNA）在肾细胞癌中的研究进展。

由于ctDNA的含量极低，检测需要非常灵敏的方法，目前的常用检测方法包括：数字PCR（digital PCR）、数字PCR－流式技术（BEAMing）、二代测序（Next-generation Sequencing, NGS），以及突变阻滞扩增系统（amplification refractory mutation system, ARMS）等。dPCR具有灵敏度高、绝对定量等优势，但仅能检测已知突变，不能检测某些突变频率较高的ctDNA。BEAMing相对于其他技术具有更高的特异度和灵敏度，但步骤复杂，操作难度较大。相比之下，ARMS技术更加简便，成本较低，但其仅能检测已知突变，并且高度依赖引物设计的特异性。NGS技术相比于前3个技术具有检测全基因组和位置突变的优势，其成本适中、高通量等特点更使其成为现阶段备受研究者青睐的测序技术，但其局限性在于测序降噪以及精准性问题。

1、ctDNA在局限性肾细胞癌诊断中的研究进展：患者基因突变图谱是肾细胞癌分子诊断学的基础，通过ctDNA基因突变和甲基化的检测，可以为肾细胞癌的诊断提供为灵敏且特异的生物学指标。在局限性肾细胞癌的术后复发监测中，cfDNA（cell-free DNA，cfDNA）升高可能是早期复发的一个生物学指标。

2、ctDNA在局部进展期肾细胞癌中的研究进展：细胞增殖周期相关基因的变异和CpG岛甲基化水平与局部进展期肾细胞癌患者的无疾病生存期及总生存期均有一定的相关性。

3、ctDNA在转移性肾细胞癌治疗中的研究进展: ctDNA检测有助于更加精准地筛选靶向治疗药物，从而施行个性化治疗。发生MET基因突变的Ｉ型乳头状肾细胞癌对靶向药物沃利替尼（savolitinib）的治疗反应较未发生MET突变的患者有更好的治疗作用，但目前尚未有对肾透明细胞癌的研究结果正式公布。ctDNA检测也有可能早期发现耐药，从而成为一种耐药监测的生物学指标。

4、ctDNA在肾细胞癌免疫治疗中研究进展：PD-1单抗Nivolumab是已经获批的转移性肾细胞癌的挽救性免疫治疗药物，利用ctDNA，可以替代肿瘤突变负荷（tumor mutation burden, TMB）作为免疫治疗反应性的预测性指标。

当前，ctDNA技术在肾细胞癌研究中的主要限制性因素包括：①体液中（主要为血浆）DNA提取量较少；②缺乏成熟的生物信息学分析方法；③在ctDNA含量极少的情况下分析数据过程中难以与背景噪音分离，假阳性率过高。因此，该领域仍需更多解决上述问题的突破性研究，从而使ctDNA更好地服务于临床。